직접 UV를 통해 소 혈청의 용혈 측정

Scientific Reports 12권, 기사 번호: 13523(2022) 이 기사 인용

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측정항목 세부정보

혈청 분석에서 신뢰할 수 없는 결과의 주요 원인 중 하나인 용혈을 일상적으로 검출하고 정량화하려면 간단하고 빠른 절차가 필요합니다. 본 연구에서는 소 혈청의 용혈을 신속하게 측정하기 위한 두 가지 서로 다른 접근법을 비교했습니다. 첫 번째는 혈청 샘플의 간단한 직접 자외선-가시광선(UV-VIS) 분광광도 측정을 통해 용혈을 추정하는 것으로 구성되었습니다. 두 번째는 혈청 샘플의 디지털 이미지에서 추출한 빨간색, 녹색, 파란색(RGB) 색상 데이터 분석과 단변량(R, G, B 및 강도 개별) 및 다변량 보정(R)을 통해 헤모글로빈(Hb) 함량을 연관시키는 것입니다. , G, B 및 강도를 공동으로) 부분 최소 제곱 회귀 및 인공 신경망을 사용합니다. 직접 UV-VIS 분석과 신경망 방법을 사용한 RGB-다변량 분석은 모두 소 혈청 샘플의 용혈을 평가하는 데 적합했습니다. 절차는 우수한 정확도(각각 100.7%와 102.1%의 평균 회수율), 적절한 정밀도(0.21~2.68%의 변동 계수), 검출 한계(각각 0.14 및 0.21gL–1) 및 최대 선형성을 나타냈습니다. 10g L–1까지.

용혈은 적혈구 막이 파괴되어 세포 내용물이 주변 체액으로 방출되는 것입니다. 이는 부적절한 검체 취급이나 병리로 인해 발생할 수 있습니다. 용혈은 일반적으로 잘못된 검체 추출, 운반, 준비 또는 보관으로 인해 시험관 내에서 발생합니다. 생체 내 용혈은 감염, 독성 영향, 면역 매개 질환, 유전적 적혈구 장애, 파종성 혈관 내 응고, 기계적 및 기타 요인과 같은 병리학적 상태로 인해 빈도가 낮으며 채혈 전에 발생합니다1. 생체 내 용혈은 환자에게 심각한 결과를 초래할 수 있으므로 병리학적 원인이 의심되는 경우 추가 조사가 필요하므로 생체 내 용혈과 체외 용혈을 구별할 목적으로 검사가 수행됩니다.

원인에 관계없이 용혈은 인간 임상 병리학에서 검체 거부의 주요 원인이며2 수의학에서도 빈번한 오류가 될 가능성이 높습니다3. 용혈은 세포 내 성분이 혈장으로 방출되거나, 시료가 희석되거나, 분광광도계 또는 화학적 간섭이 발생하여 분석 결과가 수정될 수 있습니다4. 일상적인 혈액 분석의 결과는 용혈 정도, 관련 동물 종, 분석에 사용된 방법 및 장비에 따라 달라질 수 있습니다. 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT), 아스파테이트 아미노트랜스퍼라제(AST), g-글루타밀트랜스퍼라제(GGT), 크레아틴 키나제(CK), 락테이트 탈수소효소(LDH), 리파제, 총 빌리루빈, 알부민, 포도당, 크레아티닌, 요소, 칼슘, 구리, 철, 마그네슘, 몰리브덴, 셀레늄, 아연, 칼륨, 나트륨 및 염화물5,6,7,8,9,10,11. 차이의 크기는 매우 다양합니다. 일부 분석물질의 경우 철, 아연, 칼륨 및 빌리루빈의 경우와 같이 용혈 정도와의 관계가 선형인 반면, 칼슘 및 염화물은 비선형 관계를 나타내므로 중요한 측정으로 이어질 수 있습니다. 오류1,7. 또한, 용혈은 면역분석 및 응고 테스트를 방해할 수도 있습니다12,13. 따라서 분석 전 용혈을 조절하는 것이 좋습니다.

용혈 정도에 따라 색상이 달라지므로 육안 검출은 검체의 용혈을 결정하는 가장 간단한 방법입니다. 그러나 여러 연구14,15에서 육안 검사는 용혈을 평가하는 신뢰할 수 없는 수단이며 이 관행이 임상 결정에 영향을 미칠 수 있음이 입증되었습니다16. 따라서 유리 헤모글로빈(Hb) 농도 ≥ 0.5g L–1이 가장 용혈에 민감한 분석에서 임상적으로 중요한 것으로 간주되지만17 일부 연구자들은 2g L–1 미만의 농도를 신뢰할 수 있는 시각적 검출이 어려울 수 있다고 생각합니다18. 혈청 색상의 개인차. 따라서 시료를 육안으로 검사하면 편향된 결과가 나올 수 있으며 LDH 및 AST와 같은 일부 분석물은 혈청 내 Hb 농도가 0.5g/L 미만으로 검출되는 경우에도 영향을 받을 수 있습니다8. 이러한 이유로 불필요한 검체 거부를 방지하기 위해 용혈의 정량화가 중요합니다. 따라서 객관적인 측정을 사용하여 각 분석 유형에 대해 요구되는 허용 임계값을 기준으로 샘플을 거부해야 하는지 또는 허용해야 하는지 여부를 결정해야 합니다. 더욱이, 일반적으로 교정 공식의 사용이 권장되지 않더라도 용혈 평가는 매개변수의 편향 방향을 나타내는 데 유용할 수 있습니다2.